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qPCR数据可用性判断及数据处理方法

医药速览  · 公众号  ·  · 2024-10-04 09:08
    

主要观点总结

本文介绍了如何判断qPCR数据的可用性以及相应的处理方法。判断依据包括Ct值、溶解曲线和扩增曲线。文章还介绍了qPCR数据的分析方法,包括绝对定量和相对定量,重点阐述了相对定量的计算方法。最后,文章提供了简单操作即可星标医药速览的方法。

关键观点总结

关键观点1: 判断qPCR数据是否可用的依据

Ct值、溶解曲线和扩增曲线是判断qPCR数据是否可用的主要依据。Ct值应在合理范围内,溶解曲线应展示特征峰且无杂峰,扩增曲线应呈S型并具备平台期。

关键观点2: Ct值的定义及处理方法

Ct值是PCR过程中扩增产物的荧光信号达到设定的阈值时所经过的扩增循环次数。当Ct值偏大或小时,可以通过调整模板浓度等方法进行改善。

关键观点3: 相对定量的计算方法

相对定量的计算主要采用双标曲线法和公式=POWER (2,-ΔΔCt)。计算过程中需注意ΔCt和ΔΔCt的求解,以及平行孔之间Ct值的差异控制。


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