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操作简单,检测灵敏度高的考马斯亮蓝法如何测定蛋白质含量?

医药学术  · 公众号  ·  · 2025-01-20 08:00
    

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蛋白质含量测定对于蛋白样品的检测和标定具有重要意义。目前常用的蛋白质含量测定方法主要有5种: (1)凯氏定氮法; (2)福林酚法(Lowry法); (3)双缩脲法; (4)2,2'-联喹啉-4,4'-二羧酸法(BCA法); (5)考马斯亮蓝法(Bradford法); (6)紫外-可见分光光度法。 其中,操作最简便,检测最灵敏的蛋白质含量测定当属 考马斯亮蓝法(Bradford法)。 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量(图片来源于blog.iorodeo.com) 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的原理: 在酸性溶液中 考马斯亮蓝G250 与蛋白质分子中的 碱性氨基酸(精氨酸)和芳香族氨基酸结合形成蓝色复合物 ,在一定范围内其 颜色深浅与蛋白质浓度呈正比 ,因此可以用蛋白质对照品溶液作标准曲线,采用可以通过比色法带入标准曲线即可测定样品中蛋白质的含量。 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量 ………………………………

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