细胞盖玻片免疫组化protocol及小窍门

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喜欢就关注我吧，订阅更多最新消息 一、 细胞爬片 免疫组化技术路线 1. 细胞爬片终止培养后，PBS洗2×2 min（PBS可以不灭菌），细胞载片用4%的多聚甲醛（室温）40 min—24 h，PBS漂洗，3×5min； 2. 1% Triton X-100 孵育 1次（室温） 10 分钟，PBS漂洗，3×5 min； 3. 用3%H 2 O 2 去离子水室温孵育10分钟，以消除内源性过氧化物酶活性；PBS漂洗，3×5 min； 4. 滴加封闭用正常山羊血清工作液37℃孵育20 min，倾去，勿洗； 5. 滴加一抗50μl，4℃冰箱过夜后，PBS冲洗，3分钟×3次； 6. 滴加荧光二抗，37 ℃孵育20 min，PBS冲洗，3 min×3次； 7. DAPI 10 min，PBS冲洗，3 min×3次。 二、注意事项 1. 倾去生长液冲洗、固定之后，用小镊子或手指把玻片从六孔板拿出来。擦干盖玻片的背面，在玻片背面四周涂一点凡士林，粘贴于载玻片上，会省去盖玻片经常脱落麻烦。 2.可用20%-50%甘油封片 ………………………………