在HEK293E细胞中增强重组抗体表达量：优化转染和培养参数

文章预览

目前，因哺乳动物细胞具有复杂的折叠、组装和翻译后修饰的能力，哺乳动物细胞表达系统是重组全抗体生产最流行的表达系统。首先基因被转染至哺乳动物细胞中，随后通过筛选和生成表达该基因的稳定细胞系来生产目标蛋白质。由于这一过程繁琐且费力，通常使用瞬时基因表达方法（瞬转）在早期小规模生产蛋白满足需求，这种方法在易于转染的宿主细胞上进行。目前市场上最广泛使用的宿主细胞是人胚胎肾细胞293（HEK293），通过基因工程和驯化衍生出了多种不同HEK293细胞系以增强蛋白质表达，例如本研究中使用的表达EB病毒核抗原1的HEK293E，以及表达SV40T抗原的HEK293FT和HEK293T。鉴于HEK293的可扩展性，HEK293T细胞不仅可用于各类基因表达及蛋白质生产，还可用于高滴度逆转录病毒及其他病毒包装，如腺病毒、慢病毒等。 瞬时转染生产重组蛋白主 ………………………………