主要观点总结
近期,CRISPR/Cas系统在病毒鉴定、疾病诊断辅助及预后评估等方面取得显著进展。其中,Cas12a具有非特异性切割DNA的能力,而基于Cas13的miRNA检测方法检测限较高。湖北大学与武汉轻工大学的研究人员在《Nature Communications》发表研究论文,发现了Split crRNA与Cas12a结合形成新型核酸蛋白复合物,提出了一种创新的 “分裂-重组” Cas12a系统,并开发了SCas12a即时检测技术。该技术可直接检测临床样本中的miRNA,具有低检测限、长链RNA识别、多重核酸检测能力等优势,在疾病生物标志物检测和肿瘤手术安全切缘界定中有应用潜力。
关键观点总结
关键观点1: CRISPR/Cas系统的进展及其在病毒鉴定和疾病诊断中的应用
近期CRISPR/Cas系统在多个方面取得显著进展,如Cas12a的非特异性切割DNA能力。
关键观点2: Split crRNA与Cas12a结合的创新技术
研究发现了Split crRNA与Cas12a结合形成的新型核酸蛋白复合物,开启了“分裂-重组” Cas12a系统的应用。
关键观点3: SCas12a即时检测技术的特点和优势
SCas12a技术可直接检测临床样本中的miRNA,具有低检测限、长链RNA识别、多重核酸检测能力等优势。
关键观点4: SCas12a技术在疾病诊断和肿瘤手术中的应用潜力
通过与临床医生的紧密合作,SCas12a技术有望应用于疾病生物标志物的检测和肿瘤手术安全切缘的界定。
文章预览
近期,CRISPR/Cas12a等新型核酸检测技术在病毒鉴定、疾病诊断辅助及预后评估等方面取得了显著进展 [1-3]。 Cas12a具有一种特殊能力,即在识别并切割DNA后,能够非特异性地切割周围的任何单链DNA分子。 与直接检测DNA不同,RNA底物需先逆转录成DNA才能被Cas12a识别。 此外,基于Cas13的miRNA检测方法通常具有高于10 pM的检测限 [4]。 相较于Cas12a使用的单链DNA探针,Cas13a的RNA探针成本更高,且更易降解,增加了假阳性风险和检测成本。 因此,开发新的基于Cas12的诊断工具以解决这些问题变得尤为迫切。 近日, 湖北大学生命科学学院、省部共建生物催化与酶工程国家重点实验室 刘奕 课题组,和武汉轻工大学生命科学与技术学院 乔洁 课题组 在《Nature Communications》发表了题为: Split crRNA with CRISPR-Cas12a enabling highly sensitive and multiplexed detection of RNA and DNA 的研究论
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