手把手教学｜双荧光素酶报告基因系统的实验方法和经验总结

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双荧光素酶基因报告系统（Dual Luciferase Reporter Assay System）是一种常用于评估基因调控元件（如启动子、增强子或microRNA靶点）活性的实验方法。该系统通常涉及两个质粒的共转染，其目的是为了提供更准确和可靠的实验数据。这两个质粒及其作用如下： 1. 报告质粒（Reporter Vector）： 这个质粒包含了待研究的调控序列上游的萤火虫荧光素酶（Firefly luciferase, Fluc）基因。这个调控序列可以是启动子、增强子或其他顺式作用元件。 当细胞被转染后，如果调控序列活跃，则会驱动萤火虫荧光素酶基因的表达。通过测量萤火虫荧光素酶的活性，我们可以间接了解目标调控序列的功能或活性水平。 2. 内参质粒（Control Vector）： 内参质粒通常携带海肾荧光素酶（Renilla luciferase, Rluc）基因，作为内部对照使用。它不受实验处理的影响，并且在实验设计中保持恒定 ………………………………