嗯？PCR产物检测琼脂糖凝胶「多了一条带」是怎么回事？

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图片来源：NIRO科研喵群聊截图 今日话题：“ 高GC含量(61-64%)扩增中有杂带，怎么消除呢？加 Mg^2+会消失吗？ ”小编通过查阅大量资料整理的回复是：针对高GC含量(61-64%)的扩增中出现杂带的问题，消除这些杂带需要从多个方面综合考虑，如：引物问题、PCR反应条件、使用特定的添加剂、提高模板DNA的量及使用阴性对照和阳性对照等。 (1) 引物问题 问题根源:  高GC含量的模板DNA在扩增时，由于G和C之间容易形成稳定的三对氢键，导致模板较难打开，从而增加了非特异性扩增的风险。此外，引物设计不合理，如长度过短、序列重复或含有高GC区域，也可能导致杂带的出现。 解决方案: 重新设计引物，确保引物的长度适当、序列不重复、GC含量适中，并避免在引物内部或引物与模板的结合区域出现高GC区域。可以使用专业的引物设计软件进行优化设计，有 ………………………………