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跑WB如何快速确定转膜是否成功?

爱吃洋芋的酸菜鱼  · 公众号  ·  · 2024-09-27 23:28
    

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在Western Blot(WB)实验中,转膜是将电泳分离后的蛋白质从凝胶转移到膜上的关键步骤。判断转膜是否成功,可以采取以下几种方法: 1.使用预染Marker: 转膜后,可以通过观察预染Marker在凝胶和膜上的分布来初步判断转膜效率。如果凝胶上的Marker几乎消失,而膜上有清晰的Marker条带,则表明转膜较为成功。  2.丽春红染色 :丽春红染色是一种快速的染色方法,可以用来检查膜上是否有蛋白质转移。转膜后,将膜用丽春红染色液染色,如果膜上出现均匀的红色条带,则说明转膜效果良好。具体操作方法,在前期推文中已做分享,点击 Protocol分享‖『丽春红染色』一项简单而有趣的效率验证实验 即可查看。 3.考马斯亮蓝染色: 这种方法可以用来染色电转移后的凝胶,以检查是否还有蛋白质残留在凝胶中。 如果转膜成功,凝胶中的蛋白质应该很少。 附 ………………………………

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