全览篇——实验中最常用的蛋白纯化技术有哪些

主要观点总结

本文介绍了蛋白质分离纯化的过程和方法，包括盐析、亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析等。文章详细解释了每种方法的基本原理和应用，并强调了在实际研究过程中，通常需要根据蛋白质的性质选择合适的纯化方法，并可能多种方法联用以获得高质量的蛋白质样品。

关键观点总结

关键观点1: 盐析

通过向蛋白混合液中加入一定浓度的中性盐，使蛋白质沉淀析出，达到分离纯化的目的。分级盐析可实现蛋白质的分离纯化。

关键观点2: 亲和层析

利用生物大分子与特定配体的可逆相互作用，实现分离纯化的技术。亲和层析法更高效、分辨率更高。

关键观点3: 离子交换层析

基于蛋白质带电性及带电量的不同进行分离纯化，分为阳离子交换层析和阴离子交换层析。

关键观点4: 凝胶过滤层析

基于蛋白质的形状和大小进行分离纯化，一般用于蛋白质的精细纯化。凝胶过滤层析是借助分子筛完成的。

文章预览

还不点击 蓝字 关注我们 在前面的推文中，X-Lab的各位师兄师姐陆陆续续讲解了蛋白质的分离纯化技术相关知识，我们知道很多蛋白质分析都需要使用纯化的蛋白质。在实际研究过程中，通常利用大肠杆菌表达系统、酵母表达系统、昆虫细胞杆状病毒表达系统、哺乳动物细胞表达系统来诱导目的蛋白的表达，然后利用分离纯化技术对目的蛋白进行提纯，从而获得蛋白质样品。 蛋白质的分离纯化是一个复杂的过程，通常根据蛋白质的大小、溶解度、带电性等性质的不同，采用不同的纯化策略。在这篇推文我们将对蛋白质纯化技术的基本原理以及实际应用进行介绍： 蛋白质的分离纯化实质上是将一种或者几种特定蛋白从细胞裂解液的混合物中分离出来的过程，实验中最常用的蛋白纯化技术包括盐析、亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤层析等。 一、 ………………………………