武汉大学殷昊团队开发了一种高效、快速且经济的方法制备高质量的化学修饰pegRNA和epegRNA

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  研究背景       绝大多数致病性等位基因源自特定的DNA序列变异，包括插入、缺失和碱基替换，这些变异需要精确的基因编辑技术来纠正。先导编辑（Prime editing，PE）作为新一代基因编辑技术，无需双链断裂或供体DNA模板，即可在人类细胞中实现靶向的插入、缺失以及所有12种碱基转换及其组合的编辑，克服了CRISPR/Cas9系统和碱基编辑技术的局限。然而，先导编辑的应用受到编辑效率不高和递送系统限制的挑战。化学修饰的sgRNA因其稳定性提升，已被广泛应用于研究和被FDA批准的临床治疗。与之对应，化学修饰的pegRNA也被应用于先导编辑的RNP和RNA递送中，但其编辑效率仍远低于预期。高质量且化学修饰的pegRNA对于RNP和RNA递送至关重要，然而，pegRNA的序列长度过长（约125-145 nt），尤其是引入evopreQ1基序的epegRNA（约170-190 nt），不仅合成难度很高且成 ………………………………