国自然让专家眼前一亮的“高端技术”——CRISPR筛选

主要观点总结

本文主要介绍了CRISPR筛选技术在国自然项目中的应用。CRISPR筛选技术基于细菌免疫系统发展而来，通过构建可敲除多个基因的sgRNA和Cas9酶的病毒，进行压力筛选，比较筛选前后哪些基因的敲除让细胞对压力更加耐受或敏感。该技术分为基本介绍、分类和案例、在国自然基金中的应用等部分。

关键观点总结

关键观点1: CRISPR筛选技术简介

CRISPR筛选是一种基于细菌免疫系统的基因编辑工具，使用Cas9酶和sgRNA精准定位并剪切目标DNA序列，实现基因编辑。

关键观点2: CRISPR筛选的分类和案例

CRISPR筛选可根据技术干预、文库类型、研究水平和检测指标等不同标准进行分类。根据不同的分类标准，包括基因敲除、激活和抑制等案例，展示了CRISPR筛选在各个领域的应用和高分文章的关系。

关键观点3: CRISPR筛选在国自然基金中的应用

在国自然项目申请中，CRISPR筛选技术提供了一种新的方式来确定研究的基因。可以通过全基因文库筛选的方式直接发现与热点表型、临床问题相关的基因，也可以基于前期组学数据、生信分析等通过特定基因文库的CRISPR筛选方式对显著差异表达基因进行筛选，进一步缩小基因范围，引出关键基因。

文章预览

关于国自然项目中，让专家 “ 眼前一亮 ” 的新技术中，我们已经介绍了多重免疫组化（ mIHC ）和类器官 : 国自然预实验中，哪些技术让专家眼前一亮？ —— 多重免疫组化（ mIHC ） 国自然热门技术，资助力大逐年增加，它就是 —— 类器官！ 今天我们继续介绍一个 ——CRISPR 筛选。 在国自然中，当我们研究某个科研热点（如细胞铁死亡）或者某个临床问题（如肿瘤的免疫逃逸）时，一般都是通过组学获取差异基因、抑或通过数据分析基于相关性的原理进行初步筛选，从而得到一系列基因； 如果想进一步进行研究，一般就要先验证基因表达，然后挑选基因挨个进行研究，这样带来的问题就是虽然基因表达是有差异的，但是细胞和动物水平的功能却不显著。 而以 CRISPR-Cas9 基因敲除为代表的基因功能筛选，就可以通过批量筛选的方式，进一步对差异 ………………………………