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验证蛋白-蛋白相互作用,GST pull-down实验流程与结果解读

科研根号三  · 公众号  ·  · 2024-05-17 16:44
    

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GST,全称为glutathione-S-transferase,即为谷胱甘肽-S-转移酶蛋白,可以与谷胱甘肽(glutathione,GSH)结合,其与CoIP实验都是验证蛋白互作的有效方法。 GST pull-down和与CoIP的区别 GST pull-down :原核纯化蛋白与真核蛋白在试管内发生生化反应互作的结果,只要互作蛋白间具有相互结合的结构域基础即可实验证明。 Co-IP实验 :细胞内高表达目的蛋白,并通过IgG球珠-抗体-蛋白复合物体系,分离出互作的蛋白复合物,是细胞内的体内反应结合。 相关内容推荐: 太太太详细了!Co-IP实验全流程标准实操、结果解读及实验问题解决 Part.1 GST pull-down基本概念 利用重组技术将探针蛋白与GST谷胱苷肽巯基转移酶融合,融合蛋白通过GST与固相化在球珠上的GSH谷胱甘肽结合,从而分离出能与融合蛋白相互作用是的蛋白。GST pull-down 研究对象是蛋白质与蛋白质之间的相互作用 ………………………………

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