WB问与答 ‖ 一张膜要孵多个抗体，但期刊又要求整膜怎么办？

主要观点总结

文章讨论了WB图像的要求及如何处理以满足期刊要求并减少损耗。提到的方法包括重新曝光和拼接、使用Strip液处理等。

关键观点总结

关键观点1: WB图像要求严格，需满足期刊对膜条完整性的要求。

许多期刊要求提供完整的膜条，对于多蛋白指标检测，这增加了实验难度和成本。

关键观点2: 重新曝光和拼接方法

对每张膜完整拍照，裁剪后拼接，以展示所有条带来自同一张膜。同时提交完整膜图像、拼接图像和显影条带原始图像作为补充材料。

关键观点3: 使用Strip液处理方法

在孵育第一个抗体后拍摄照片，使用strip液洗膜并重新孵育第二个抗体。同一张膜上检测多个蛋白，但需注意洗脱和重新孵育对蛋白完整性和信号强度的影响。

关键观点4: 选择合适的方法需要考虑实验要求、设备以及期刊指导原则。

在实施任何方法前，建议阅读期刊的作者指南，并根据需要进行预实验以优化条件。

文章预览

目前，对于WB图像是越来越严格了，很多期刊都要求提供完整的膜条。对于需要检测多个蛋白指标的实验，这无疑非常的劳命伤财。 那有没有一些比较好的办法既能够满足期刊的要求，又能减少人力物力的损耗呢？ 下列是目前比较常用的处理方法：   重新曝光和拼接： 首先对每张膜进行完整拍照，然后将裁剪后的条带重新拼接，以恢复到原始膜的布局。这样可以清楚地展示所有条带均来源于同一张膜，排除了条带替换或篡改的可能性。最终，将完整的膜图像、裁剪后拼接的图像以及显影条带的原始图像一并作为补充材料提交。    使用Strip液处理 ： 在孵育第一个抗体后拍摄完整膜的照片，然后使用strip液洗膜并重新封闭和孵育第二个抗体。这样可以在同一张膜上检测多个蛋白，但需要注意洗脱和重新孵育可能会对蛋白的完整性和信号强度产生影 ………………………………