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PCR时“模板DNA”加多了会发生什么?

IVD从业者网  · 公众号  ·  · 2024-11-24 18:06
    

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文章来源于分子庄园,作者木子庄主 1、形成竞争性抑制 过多的模板分子会与聚合酶、dNTPs、引物或其他反应组分形成非生产性的复合物,形成竞争性结合,减少有效催化反应的机率和效率。 庄主推荐: 用“ 聚合酶链式反应 ”打开“ 中心法则 ” 2、导致非特异性扩增 过量的模板可能导致引物与非目标区域的结合增加,引起引非特异性扩增。 庄主推荐: PCR中藏着什么秘密? 非特异性扩增不仅消耗反应试剂,还会干扰有效扩增,影响特异性扩增的效率和产量。 3、影响酶动力学 在反应混合物中DNA浓度过高会影响酶的动力学特性,降低其反应速率。 1)酶分子的过饱和结合 过高的底物浓度使酶分子和底物的结合饱和,可能影响其结构进而改变其活性状态。 庄主推荐: “ 酶分子 ” 的抑制和失活 2)反应条件的改变 ①体系粘度增加 过高的DNA模板浓 ………………………………

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