【实验步骤】检测 NADH氧化酶(NOx), L-半胱氨酸氧化酶(LCO)和谷胱甘肽氧化酶(GSHOx)活性及酶动力学

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NOx-like: 通过添加不同量(50、100、150、200、250 μM)的NADH溶液进行以NADH为底物的Cu-N4 SA或Cu-NS SA的动力学测定。 产物在340 nm处(ε=6220 M -1 cm-1)用紫外可见分光光度计测定吸光度。 通过Lineweaver-Burk Plot计算出Michaelis-Burk常数:1/V=Km/ Vmax (1/[S] + 1/Km)。 LCO-like: 以DTNB (300 μg mL-1)和不同浓度(0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 mM)的L-Cys为催化剂进行稳态动力学分析。用紫外可见分光光度计记录吸光度(TNB ε=13600 M-1 cm-1)。通过Lineweaver-Burk Plot计算出Michaelis-Burk常数:1/V=Km/ Vmax (1/[S] + 1/Km)。 GSHOx-like: 以DTNB (300 μg mL-1)和不同浓度GSH(0.1、0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 mM)为催化剂进行稳态动力学分析。用紫外可见分光光度计记录吸光度(TNB ε=13600 M-1 cm-1)。通过Lineweaver-Burk Plot计算出Michaelis-Burk常数:1/V=Km/ Vmax (1/[S] + 1/Km)。 文献来源： 程序化靶向丙酮酸代谢疗法放大单原子纳米酶激活细胞焦亡用于免疫 ………………………………