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对于刚入门蛋白质组学的小伙伴们或许经常能够在文献中看到“ 自上而下(Top-down) ”、“ 自下而上(Down-up) ”和“ 鸟枪法(Shotgun) ” 这三个词,带来不少的困惑,下面就让我们一起来了解这三个词的具体含义和区别。 自上而下(Top-down) 概念 :直接 分析完整的、未经消化的蛋白质。 步骤 :将完整的蛋白质通过质谱仪进行分析,质谱可以测量出蛋白质的分子量和结构信息。 优点 : 保留了 蛋白质的完整结构信息,包括翻译后修饰(如磷酸化、甲基化等) 。 可以获得 蛋白质异构体或亚型 的信息。 缺点 : 对于大分子蛋白质来说,分离和分析较为困难。 需要高分辨率和高精度的质谱仪。 适用场景:用于需要精确蛋白质结构信息的研究,如翻译后修饰或蛋白质异构体分析。 2. 自下而上(Bottom-up) 概念 : 通过将蛋白质样本酶解成小肽段,
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