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师姐的史诗级 WB 结果图,竟然不用转膜?

生物学霸  · 公众号  · 生物  · 2024-07-11 17:30
    

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师弟最近在狂补 WB 结果,但面对 200 Kda 蛋白这座大山,结果图却一次比一次糊—— 「弥散、模糊、背景过高」 没有一个图能用上。组会上师姐紧急支了 5 招: 师姐 一般来说,通过细致调整上述参数,可以有效改善 WB 转模糊的问题,提高实验结果的清晰度和特异性。 谢谢师姐,但是电压和抗体浓度我都做过梯度测试;凝胶没问题;试剂每次也都现配;封闭我也调整到 1.5 小时了,还是会糊。 师弟 我还有 2 块 96 孔板的样本,导师这个月就要结果,可怎么办呀? 师弟 师姐 如果还不行,我教你一条 「WB 捷径」, 凝胶扔了,也别转膜,用这个实验,30 个样本,5、6 个小时就出结果。 这是啥方法?师姐你快讲讲! 师弟 一种不提蛋白不转膜的 WB:In-Cell Western ,顾名思义,是一种在细胞内就可以完成的简单 WB。比传统 WB 简单、快速、便捷。 01、更快 ………………………………

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