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实验二 | 琼脂糖凝胶电泳(知识分享)

NIRO科研喵  · 公众号  ·  · 2024-07-29 07:30

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图片来源:知乎红皇后学术 实验目的 学习并掌握琼脂糖凝胶电泳分离DNA的原理,以及检测质粒DNA的纯度、浓度和分子量的方法。 实验原理 琼脂糖凝胶电泳是分离、鉴定和纯化DNA的重要技术,也是基因操作的重要技术之一。琼脂糖是一种天然的长链状聚合分子,它在沸水中溶解,当温度降至45℃时开始凝固并形成多孔刚性立体网状结构,其孔径的大小取决于琼脂糖的浓度。 DNA分子在碱性环境中带负电荷,并在外加电场的作用下向正极移动。DNA分子在琼脂糖凝胶中移动时,存在电荷效应与分子筛效应。不同DNA的分子量大小及构型各不相同,因此它们在电泳中的迁移率也会有所不同,从而可分离出不同的区带。例如,质粒DNA主要有环状超螺旋、开环和线性3种构型,电泳时它们的迁移率各不相同(超螺旋>线性>开环)。如果利用电泳技术鉴定质粒DNA的分 ………………………………

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