专栏名称: 小张聊科研
聊聊跟科研有关的感想心得,如基金,文章和实验。
今天看啥  ›  专栏  ›  小张聊科研

国自然申请|“小分子药物-蛋白互作”的7种常用技术,让专家“眼前一亮”的技术来了!

小张聊科研  · 公众号  · 科研  · 2024-10-07 14:00

主要观点总结

本文主要介绍了研究小分子药物和蛋白互作的七种方法,包括表面等离子共振技术(SPR)、药物亲和反应靶向稳定性DARTS、细胞热迁移技术(CETSA)、小分子-蛋白质Pull-down技术、等温量热滴定(ITC)、微量热泳动技术(MST)和荧光偏振免疫分析法(FPIA)。这些方法都有相应的实验流程和常用指数,可以用于筛选和验证药物与蛋白的相互作用。

关键观点总结

关键观点1: 表面等离子共振技术(SPR)

一种基于光学原理的分析技术,可以实时监测生物分子之间的相互作用。实验流程包括芯片准备、芯片激活、配体偶联、分析物注入、实时监测和数据分析等步骤。

关键观点2: 药物亲和反应靶向稳定性DARTS

用于小分子药物靶点筛选和鉴定的方法。原理是小分子药物与其靶标蛋白结合后,会使得靶标蛋白对蛋白酶的降解敏感性下降。实验流程包括样品准备、药物孵育、蛋白酶处理、凝胶电泳分析和数据分析等步骤。

关键观点3: 细胞热迁移技术(CETSA)

用于检测细胞内药物与靶蛋白结合效率的实验技术。当靶蛋白与药物分子结合时,通常会变得更稳定。实验流程包括细胞转染、药物暴露、细胞收集、蛋白质提取和Western blot验证等步骤。

关键观点4: 小分子-蛋白质Pull-down技术

通过化学修饰小分子化合物,利用亲和层析的方法从细胞或组织中提取的蛋白质中捕获与小分子结合的蛋白,并通过质谱技术鉴定和筛选小分子的特异性结合蛋白。

关键观点5: 等温量热滴定(ITC)

通过测量反应体系温度的变化来研究分子间的相互作用,适用于研究蛋白、核酸、多肽、药物分子等的相互作用。

关键观点6: 微量热泳动技术(MST)

基于检测在温度梯度中的生物分子电泳迁移率的变化,从而分析分子间相互作用以及各种化学剂量学参数。

关键观点7: 荧光偏振免疫分析法(FPIA)

一种基于荧光偏振原理的定量免疫分析技术,用于研究生物分子间的相互作用。


文章预览

上期介绍了 10 种研究蛋白 - 蛋白互作的常见方法 ,今天介绍几种研究小分子药物和蛋白互作的一些方法: 表面等离子共振技术( SPR )、药物亲和反应靶向稳定性 DARTS 、细胞热迁移技术( CETSA )、小分子 - 蛋白质 Pull-down 技术、等温量热滴定( ITC )、微量热泳动技术( MST )和荧光偏振免疫分析法( FPIA ) 。 一、表面 等离子共振技术( SPR ) 常用指数—☆☆☆☆☆,既可以用于筛选,也可用于验证, 一般为国自然项目必选 表面等离子共振 ( Surface Plasmon Resonance ,简称 SPR) 是一种基于光学原理的分析技术,它能够实时监测生物分子之间的相互作用。 SPR 技术的原理是在金属表面上发生全反射时,形成消逝波进入光疏介质中,与介质中的等离子波相遇时可能发生共振现象。 这种共振导致反射光强度的降低,通过检测这种变化可以分析分子间的相 ………………………………

原文地址:访问原文地址
快照地址: 访问文章快照
总结与预览地址:访问总结与预览