大肠杆菌感受态细胞的制备和质粒转化

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大肠杆菌宿主菌株作为受体细胞，当这些受体细胞经过( CaCl 2 )处理时，它们的细胞膜通透性会发生暂时性的改变，从而成为能够允许外源 DNA 分子进入的感受态细胞。 一、感受态细胞 1.感受态： 受体细胞最容易接受外源基因并将其转化的一种 生理状态 。 2.感受态细胞： 受体细胞通过理化方法处理，使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态的细胞。 3.感受态菌龄： 细胞的感受态一般出现在 对数生长期 ，新鲜幼嫩的细胞是制备感受态和实现成功转化的关键。 4.质粒转化： 质粒DNA或以他为载体构建的重组子导入细菌的过程。 二、感受态细胞制备的原理 1.外源基因表达的条件： 重组 质粒必须通过转化进入细菌细胞内，才能进行扩增和表达，从而获得大量的克隆基因。 2.感受态制备原理： 将快速生长的大肠杆菌置于经低温0℃预处理的低渗氯化钙 ………………………………