实验三 | DNA浓度测定与酶切反应(知识分享)

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图片来源：网络 实验目的 学习光密度法测定DNA浓度、限制酶切割DNA以及电泳检测酶切效果的方法。 实验原理 DNA的浓度、完整性和纯度的检测，一般通过琼脂糖凝胶电泳法(用于检测DNA的浓度和完整性)和光密度法(或称分光光度计法，用于检测核酸的纯度和含量)进行。DNA吸收光谱的特征峰在260nm处，测定此波长DNA溶液的OD(optical density )值，当OD260=1时，双链DNA的浓度约为50 μg/mL，据此可以计算溶液中DNA的总含量。蛋白质的特征吸收峰在280nm处，因此在测定DNA含量的同时，通常还测定OD260/OD280的值。如果该比值在1.8-2.0范围内，就认为DNA具有较高的纯度，否则表明DNA溶液中杂质较多，从而可能会影响后续的酶切反应。 II型限制性内切酶能专一识别特定的碱基序列并切断双链DNA，因此在基因工程中得到了广泛应用。Hind III型酶属于II型限制性内切酶，其识别的 ………………………………