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作者 | NIRO 来源 | NIRO（ID：NIRO-keyanmiao） 编辑 | 澹泊研究僧 在前面写过《 为什么跑WB实验每次上样需要煮「蛋白」？ 》这篇文章，很多同学都问: “我把所有蛋白都煮了，放-80℃保存，拿出来解冻后还需要重新煮一下再上样吗？” 我们知道“煮蛋白”的主要目的就是通过高温使蛋白质变性，破坏天然的三维结构，使得蛋白质成为线性的无电荷的多肽链。这种变性处理是为了增加蛋白质在后续SDS-PAGE电泳中的均一性和分辩性。 图源来源：网络 因此，一般情况下，蛋白质经过彻底变性后，可放置-20℃/-80℃中2-3个月不需要再次煮沸； 但是，NIRO建议: 裂解后的裂解产物用EP管进行分装保存于-80℃，每次实验前重新BCA测定蛋白浓度(因为长时间保存蛋白会在一定程度上自主降解)，再按自己的体系加Loading buffer在金属浴/水浴进行煮样，然后上样 (最好做到
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