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iNature CasX(也称为Cas12e)是一种2类CRISPR-Cas系统,与广泛使用的Cas9和Cas12a相比,它的体积更小,在基因组编辑中显示出前景。 虽然CasX- sgRNA-DNA三元配合物的结构已经被解析并揭示了一个独特的NTSB结构域,但CasX的动态行为尚未得到很好的表征。 2024年7月12日,清华大学陈春来、 刘俊杰 共同通讯在 Nucleic Acids Research 在线发表题为 “ Conformational dynamics of CasX (Cas12e) in mediating DNA cleavage revealed by single-molecule FRET ” 的研究论文,该研究 表征了CasX从非特异性结合到找到靶点并完成切割的动态过程,揭示了其独特的机制, 为未来的蛋白质工程开辟了一条新的途径。 研究采用单分子和生化方法研究了两个CasX同源物DpbCasX和PlmCasX从DNA结合到靶切割和片段释放的构象动力学。研究结果表明,CasX以相对不可逆的动力学顺序切割非目标链和目标链。两种CasX同源物具有不
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