实验十四 | 还有人不知道，反转录 PCR (知识分享）

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作者 | NIRO 来源 | NIRO（ID：NIRO-keyanmiao） 编辑 | 澹泊研究僧 为了研究基因或RNA的功能，通常需要将RNA转化为更稳定的cDNA，以便能用于克隆、PCR、测序和文库构建等实验。在反转录酶(或称逆转录酶)的作用下，以RNA(mRNA)为模板合成单链互补DNA(Complementary DNA, cDNA)的过程称为反转录(Reverse Transcription, RT)，然后以单链cDNA为模 板进行PCR，扩增目的基因全⻓或部分片段的过程则称为反转录PCR，也即RT-PCR。 RT-PCR是检测基因的时空表达特性和表达水平最常用和最灵敏的方法，是基因 功能研究的一项很重要技术。如果是利用RT-PCR扩增基因片段来构建表达载体，那么必须使用保真性很强的Taq DNA聚合酶来进行PCR，以减少PCR过程中突变的产生。 常用的反转录酶主要有两种 :  一种是来源于莫罗尼小鼠白血病病毒(Moloney murine leukemia virus，MMLV)的反转录酶，另一种是来源 ………………………………