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近期,看了一些博主写了关于Western blot转膜条件的经验(《 为什么WB实验中,目的蛋白会出现“多条带”或“条带大小与预期不符” 》),非常值得借鉴。但是我想纠正一些说法, 例如:转膜液现配现用,用完就倒掉,最多用超过3次左右,本人是不赞同的 。 首先,本人在校时自己配制的电泳转膜液就用了超过3次,该有结果的还是有结果,没有结果的还是没有结果;其次别人的研究论文文献都有相关的验证转膜液Transfer Buffer,摘要结论得出 至少可以使用5次以上 ,但在文献中作者甚至使用到7次以上 。 图片来源:《Transfer Buffer Containing Methanol Can Be Reused Multiple Times in Protein Electrotransfer》截图 因此,转膜液不需要现配现用,4℃保存可以反复使用至少5次以上,对WB的结果不起决定性作用。 现配现用,用完就倒掉会造成严重的环境污染 。 值得一提的是
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