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为什么跑WB实验每次上样需要煮「蛋白」?

NIRO科研喵  · 公众号  ·  · 2024-09-14 07:30

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作者 | NIRO酋长 来源 | NIRO(ID:NIRO-keyanmiao) 编辑 | 澹泊研究僧 在 WB 实验中,煮蛋白的时间是一个关键的参数,它影响着蛋白质与 SDS 的结合程度、蛋白质的变性程度以及后续电泳的分离效果。 为什么要煮蛋白呢?有什么原理呢? 促进 SDS 与蛋白质的充分结合 ,SDS 作为阴离子去污剂,能够与蛋白质结合,使其完全变性和解聚,形成带负电荷的棒状结构。这种结构在电场中能够稳定迁移,是电泳分离的基础。 然而,SDS 与蛋白质的结合并非自发进行,需要一定的条件来加速这个过程。高温处理(如煮沸)能够显著提高 SDS 与蛋白质的结合效率,确保蛋白质完全变性和解聚,便于后续蛋白质 分子量大小进行分离 。 破坏蛋白质的高级结构 ,蛋白质的高级结构 (包括二级、三级和四级结构)是由多种非共价键(如氢键、疏水键、离子键等)维持的。这些高级 ………………………………

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