实验七 | 重组转化子的快速鉴定(知识分享)

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图片来源：网络 经转化在选择培养基上生长的转化子被假定为阳性重组子，但实际上需要进一步鉴定是否含有外源的重组DNA。常用的鉴定方法包括抽提质粒DNA进行酶切、电泳分析，甚至测序等。 图片来源：GenStar官网 一步法快速抽提质粒DNA技术能够在短时间内同时检测多个转化子样品，实现初筛。 实验目的 学习并利用掌握利用碱裂解法快速鉴定重组子的方法。                                      实验 原理 通过蓝白斑筛选(α-互补)法，可以有效地筛出重组子(即白色克隆)。但是，并非所有的白色克隆都含有插入片段，这种情况被称为假阳性。假阳性产生的原因有多种，主要包括限制酶中可能存在的外切酶活性、限制酶的星活性、物理剪切力导致的片段末端破坏，以及自然突变等。鉴定假阳性菌落的方法有很多种，包括限制酶酶切方法、碱裂 ………………………………