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实验技巧分享:怎样避免组织和细胞自发荧光干扰?

科研根号三  · 公众号  ·  · 2024-07-04 17:19

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自发荧光是组织/细胞样本在荧光检测过程中产生的与目的信号无关的背景荧光信号。 如下图中的大片绿色荧光,几乎都是自发性荧光。 自发荧光的解决办法有2种:采用冰冻切片染色或降低石蜡切片染色的自发荧光。 本文主要是探讨: 如何降低免疫荧光染色实验中的石蜡切片自发性荧光 。 石蜡切片的特点 01 石蜡切片可以薄至3μm 实验过程中组织损耗较少 用普通小鼠、基因敲除小鼠等小动物进行实验时,我们经常需要对同一组织进行病理、分子生物学研究,冰冻切片会极大消耗组织用量,而石蜡切片可能是一个更折中的选择。 02 石蜡切片可以较好地保存 抗原的空间结构 免疫学实验最初的目的并不是为了定量研究,而是为了观察抗原在组织中的空间定位。石蜡切片组织结构的空间位置保存较好,几乎是原位保存。 虽然冰冻切片几乎看不到太多的 ………………………………

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