专栏名称: 爱吃洋芋的酸菜鱼
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原来不能将就的除了抗体,还有默默付出的底物

爱吃洋芋的酸菜鱼  · 公众号  ·  · 2025-01-15 10:56
    

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我们都知道,一抗质量的好坏对我们利用抗原抗体反应(如WB)为原理的实验十分重要,一支优质的抗体对于我们的实验可以起到事半功倍的效果。 但是大家是否曾关注过默默耕耘的底物呢? 在WB实验中, 底物参与的是最后一步——显色或发光反应。 在这一步骤中,酶(如HRP或AP)催化底物发生化学反应,生成可见的颜色变化或发光信号。这个信号用来指示抗体结合的位置,即目标蛋白所在的位置。因此, 底物的性质(如灵敏度、稳定性、背景信号等)直接关系到实验结果的质量和可靠性。 常见底物类型  化学发光底物  HRP(辣根过氧化物酶)相关底物    鲁米诺(Luminol) 灵敏度:非常高,可达fg级别,适合低丰度蛋白的检测。  特点:化学发光法通过HRP催化Luminol(也就是我们常用的 ECL A液 )和H₂O₂( ECL B液 )反应产生光信号,适合多重检 ………………………………

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