【实验步骤】ROSGreenTM H2O2探针检测H2O2

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采用 ROSGreenTM H2O2探针 分别检测两种szymes通过NOx-like和LCO-like产生H2O2的能力。将100 μg mL-1 Cu-N4 SA (Cu-N4 SA)用含1mM NADH (L-半胱氨酸)的PBS (0.01 M, pH 6.0)在室温下孵育1 h。离心后取上清液，加入5 μM ROSGreenTM H2O2探针。在荧光分光光度计(F7000)上使用490 nm的激发波长记录发射光谱。 细胞内H2O2检测: 将4T1细胞(每孔1×104个细胞)接种于96孔板中24 h，然后将细胞上清液替换为含有不同纳米颗粒的新鲜酸性培养基(Control、Cu-N4 SA、Cu-NS SA、UK5099、Cu-NS@UK、POx、Cu-NS@POx、Cu-NS@UK@POx)，继续孵育12 h。随后，去除培养基，将处理后的4T1细胞进一步与5 μM ROSGreenTM H2O2探针孵育30 min。荧光显微镜下观察荧光信号。 文献来源： 程序化靶向丙酮酸代谢疗法放大单原子纳米酶激活细胞焦亡用于免疫疗法， Advanced Materials  ( IF 27.4 )  Pub Date : 2024-02-05 DOI: 10.1002/adma.202312124 ………………………………