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Nat. Commun.│分裂crRNA结合CRISPR-Cas12a,实现RNA和DNA的高灵敏和多重检测

纳在浙里  · 公众号  ·  · 2024-10-31 09:55
    

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摘要 : CRISPR-Cas12a 系统以其快速且精准的特性,革新了核酸检测( NAT )领域,尽管传统上它需要 RNA 的预扩增。作者开发了快速的荧光和侧流 NAT 检测方法,这些方法使用了分裂 Cas12a 系统( SCas12a ),该系统由 Cas12a 酶和分裂 crRNA 组成。 SCas12a 检测方法能够实现对 miRNA 和长 RNA 的高灵敏、免扩增和多重检测,且无需复杂的二级结构。它还能区分成熟的 miRNA 和其前体( pre-miRNA ),这对于精确的生物标志物识别和癌症进展监测至关重要。该系统的特异性进一步通过其检测 DNA 和 miRNA 点突变的能力得到突出。值得注意的是, SCas12a 系统能够量化来自宫颈癌患者血浆中的 miR-21 生物标志物,并且当与 RPA 结合时,能够在临床样本中检测到阿摩尔水平的 HPV 。总的来说,作者的工作展示了一个简单且成本效益高的基于 SCas12a 的 NAT 平台,适用于多种诊断环 ………………………………

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