NBT | 厦门大学刘亮团队发现DNA或RNA靶结合激活Cas9的反式核酸酶活性

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编者按 V型和 VI型CRISPR-Cas系统已被证明可以反式切割非特异性单链DNA (ssDNA)或单链+RNA (ssRNA)，但在使用sgRNA的II型CRISPR-Cas系统中尚未观察到这一点。 2024年5月29日，厦门大学刘亮团队在 Nature Biotechnology   在线发表题为 “ Trans -nuclease activity of Cas9 activated by DNA or RNA target binding ” 的研究论文， 该研究表明由CRISPR RNA和反式激活CRISPR RNA双RNA引导的II型CRISPR-Cas系统对ssDNA和ssRNA底物都显示出RuvC结构域依赖的反式切割活性。 Cas9对反式切割底物具有序列偏好，倾向于切割富含T或C的ssDNA底物。研究发现Cas9的反式切割活性可以被靶ssDNA、双链DNA和ssRNA激活。Cas9与向导RNA和靶RNA复合物的晶体结构为结合靶RNA激活Cas9提供了结构基础。 基于Cas9的反式裂解活性和核酸扩增技术，开发了DNA激活Cas9检测和RNA激活Cas9检测的核酸检测平台，能够对DNA和RNA样品进行高灵敏度和特 ………………………………