经典永不过时-乳糖操纵子：从蓝白斑筛选到增强子活性检测

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1. 蓝白斑筛选 蓝白斑筛选 是一种快速有效的 重组细菌鉴定技术 ， 依赖于β-半乳糖苷酶的活性 。 β-半乳糖苷酶 是一种在大肠杆菌中出现 的酶 ，将 乳糖 切割成 葡萄糖 和 半乳糖 。 乳糖操纵子的正负调控机制： 1、乳糖操纵子（lac）是由调节基因（lac I）、启动子（lac P）、操纵基因（lac O）和结构基因（lac Z、lac Y、lac A）组成的。lac I编码阻遏蛋白，lac Z、lac Y、lac A分别编码β-半乳糖苷酶，β-半乳糖苷透性酶和β-半乳糖苷转乙酰基酶。 2、 阻遏蛋白的负性调控 ： 当 培养基中没有乳糖 时，阻遏蛋白结合到操纵子中的操纵基因上，阻止了结构基因的表达 。 当 培养基中有乳糖时 ，乳糖（真正是异乳糖）分子和阻遏蛋白结合，引起阻遏蛋白构象改变，不能结合到操纵基因上，使RNA聚合酶能正常催化转录操纵子上的结构基因，即操纵子被诱导表达 。 ………………………………