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细胞冻存操作过程视频和步骤

生命科学技术摘集  · 公众号  ·  · 2024-08-20 08:30

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1、【准备工作】: a、显微镜下观察细胞,细胞融合度达到80%以上(抱团生长细胞,融合度60%以上),进行冻存(或传代)。 b、用75%酒精和无尘布,将超净工作台(生物安全柜)台面,按照左右顺序充分擦拭。摆放好离心管、1mL移液器、废液缸(干湿分类)。同时,37度预热完全培养基、PBS等培养试剂材料(胰酶不需要预热,但使用前需要从4度冰箱拿出室内平衡)。 c、开启超净台风机(二挡)。将所用试剂材料表面喷洒75%酒精消毒后放入超净工作台内,用酒精棉球擦拭试剂瓶瓶口,去掉封口膜,更换酒精棉球再次擦拭试剂瓶或离心管瓶口。 2、【清洗】(共清洗两次): 在超净工作台内,轻轻晃动瓶内培养液,打开瓶盖,倾斜瓶口将液体倒入废液缸。按4mL/T25瓶的量,用1mL移液器向培养瓶内侧壁加入4ml PBS(预热过的),水平轻轻晃动瓶内液体, ………………………………

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