在WB实验中，把PVDF膜叠在一起孵一抗会影响检测效果吗？

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在做WB实验的过程中，我们有时候为了节省时间和试剂，会把转好的PVDF膜（裁剪过或不裁剪）放在一个容器中一起孵育。那这样做会不会影响我们的实验结果呢？先来看下别人做的对比数据 实验条件 条带强度（灰度值） 背景信号（灰度值） 叠放3张PVDF膜 8500 ± 1200 3200 ± 450 单独孵育 21500 ± 1800 800 ± 150 数据来源：Huayunbio实验平台 根据实验数据统计，叠膜操作会使目标蛋白的抗体结合效率下降30%-50%，还会增加膜的背景信号。这无疑会导致我们的 实验重复性受损 ，所以不建议大家在实验过程中叠膜放。（ 注：如果大家实在是资源紧张，不得不采取这样的操作时，可以尝试将两张膜一张正面朝下，一张正面朝上背对背放置，实验室有人这样操作，我自己也这样敷过，总体来说没啥影响，但是没有做过相关分析，所以仅供参考。 ） 下面分析一下之 ………………………………