手把手教学｜组织蛋白的提取

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动物组织蛋白的提取即通过物理研磨和破碎组织的方法，以及化学手段增加细胞膜通透性、破坏细胞膜和破坏蛋白质间相互作用，从而提取细胞中的可溶性蛋白质。 组织蛋白提取步骤： 1、准备好所需数量的离心管，并在每个管中放入研磨珠，将它们置于冰盒上备用。 2、从-80℃冰箱取出所需的动物组织，将其置于冰上解冻。在此过程中，准备EP管，并依次进行称量、校零、加入组织、再次称量，并记录每个管中组织的重量。 3、对组织块进行预冷 PBS 洗涤 2-3 次，以除去血污，然后将其放在滤纸上，吸除多余的 PBS 后放入对应的匀浆管中。 4、加入大约10倍样本体积的 RIPA 裂解液（按需加蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂）。将管置于组织研磨仪中，对称放置后盖上盖子，选择程序开始匀浆。 5、匀浆完成后，将匀浆管置于冰上静置30分钟，以充分裂解组 ………………………………