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反相色谱(RHPLC)中固定相的选择策略:多肽高效分离的理论

药事纵横  · 公众号  ·  · 2025-03-23 06:00
    

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声明:因水平有限,错误不可避免,或有些信息非最及时,欢迎留言指出。本文仅作医疗健康相关药物介绍,非治疗方案推荐(若涉及);本文不构成任何投资建议。 1. 引言 多肽作为生物制药、诊断试剂和功能研究的重要分子,其纯化效率直接影响下游应用效果。反相高效液相色谱(RP-HPLC/RPLC)因其高分辨率、重现性和灵活性,成为多肽分离的首选技术。固定相(色谱填料)的选择是多肽分离的核心,需综合考虑多肽性质、分离目标及工艺效率。 2. 反相色谱分离多肽的基本原理 反相色谱通过多肽与固定相之间的疏水相互作用实现分离。固定相表面键合的非极性官能团(如C18、C8)与多肽的疏水区域结合,流动相中有机溶剂(乙腈、甲醇)梯度增加时,疏水性较弱的多肽先被洗脱,疏水性强的多肽保留更久。分离效率取决于: 固定相化学性质(键 ………………………………

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