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PCR实验中,除了Taq DNA聚合酶,缓冲液(Buffer)真的那么重要吗?Beffer要怎么优化呢?

NIRO科研喵  · 公众号  ·  · 2024-07-19 07:30
    

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图片来源:网络 在PCR(聚合酶链式反应)实验中,缓冲液(Buffer)确实扮演着至关重要的角色,其重要性不亚于 Taq DNA 聚合酶。缓冲液不仅为PCR反应提供了一个最适的酶催反应条件,还通过调节pH值、提供必要的离子环境等方式,确保PCR反应的高效、特异性进行。 PCR扩增缓冲液的重要性 (1) 维持pH稳定:  PCR反应是一个复杂的生 物化学过程,涉及多种酶和底物的相互作用。这些相互作用对pH值极为敏感,任何微小的pH波动都可能影响酶的活性和底物的结合效率。缓冲液作为反应体系中的“稳定器”,能够抵抗外界酸碱度的干扰,维持反应体系在一个相对稳定的pH范围内。这对于保证PCR反应的高效、特异性有着至关重要的作用。 (2) 提供离子环境:   除了维持pH稳定外,缓 冲液还为PCR反应提供了必要的离子环境,如: 镁离子(Mg2+)是 Taq DNA 聚合酶催化反应所必需 ………………………………

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