哭死！「蛋白纯化」寸步难行，它咋就不挂镍柱啊

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作者 | NIRO 来源 | NIRO（ID：NIRO-keyanmiao） 编辑 | 澹泊研究僧 我们知道 His-Tag 标签是重组蛋白纯化最为常见的标签，其原理是将Ni2+螯合配体固定在层析介质上，组氨酸(His)带有一个咪唑基团，该基团能够与Ni2+形成配体键并选择性结合，而不带有 His 残基的蛋白不能与Ni2+形成配位键并结合，这样便能有效的将目的蛋白(具有 His-Tag 的蛋白)与非目的蛋白进行有效区分。随后通过高浓度的缓冲液与 His-Tag 竞争结合 Ni2+，将目的蛋白洗脱并进行收集，从而获得较纯的目的蛋白。 但除了 His-Tag 标签外，还存在以下几种标签，这分别有什么优/缺点呢？ 图为 常见的亲和标签 所以，选择合适的标签对于蛋白纯化至关重要，这也是为什么蛋白挂不住镍柱的原因之一。 那为什么重组蛋白会使用不同的标签呢？ 因为不同的标签蛋白可以提高重组蛋白的溶解度，并可用 ………………………………