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干货,如何知道设计的引物的覆盖度?

IVD从业者网  · 公众号  ·  · 2024-05-19 11:55
    

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很多人问我,怎么知道设计引物的覆盖度情况。今天简单的介绍下,如果生信比较强,可以自己建数据库,利用blast软件,进行比对统计。也可以使用MFEprimer3软件,进行比对。今天介绍一个简单方便的方法,供大家参考。 以肺炎链球菌( Streptococcus pneumoniae )为例,首先登录NCBI的primer-blast网站:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/index.cgi?LINK_LOC=BlastHome。如下图所示,在Database选项选nr,Organism选项选择,Streptococcus pneumoniae作为比对数据库。然后开始进行检索。 检索完成后,就会得到如下结果页面,如下图所示,会获得很多的比对到的结果。 然后,将NCBI比对的结果页面,进行整理,会获得如下的结果,可以覆盖298个 肺炎链球菌的基因组序列。 最后,我们在NCBI(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/datasets/genome/?taxon=1313 _level=2:3)上检索肺炎链球菌的基因组数量, ………………………………

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