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Biosens Bioelectron | SATCAS: 基于CRISPR/ Cas13的单锅式RNA检测和SNP鉴别检测平台

早筛网  · 公众号  ·  · 2024-08-30 17:00
    

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病原感染性疾病的临床诊断越来越需要灵敏、快速的RNA检测技术。RNA引导的簇状规则间隔短回文重复序列CRISPR/Cas13a系统由于其反式切割活性在分子诊断领域显示出巨大的潜力。然而,大多数基于cas13的检测方法需要一个扩增子转录步骤,并且多步骤的开管操作容易受到污染,限制了它们的广泛应用。在这里,作者提出了一个超灵敏(单拷贝范围,~aM)和快速(在40分钟内)的等温单管RNA检测平台,称为SATCAS(Simultaneous Amplification and Testing platform based on Cas13a)。该方法在总菌落数不变的条件下,能有效区分活菌(0% ~ 100%),具有稳健性和通用性。SATCAS在识别单核苷酸多态性(SNPs)方面表现出色,能够检测出0.5%的耐药突变。作者通过检测68例HBV、23例EBV和48例SARS-CoV-2患者的生物样本来验证SATCAS,在HBV感染检测中达到100%的灵敏度、92.86%的特异性和97.06%的 ………………………………

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