手把手教学｜流式细胞仪检测ROS的实验步骤及结果分析

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活性氧（ROS）是氧代谢的天然副产物，正常情况下，机体含量较低。当机体受到损伤刺激时，如药物毒性、缺氧等，ROS水平会急剧增加，超过机体自身清除能力时，机体氧化-抗氧化作用失去平衡，从而导致细胞膜破坏，最终引起机体细胞死亡。因此，ROS的测定有助于判断细胞损伤情况。 基本原理：目前检测细胞内ROS水平常用的是DCFH-DA荧光探针法。DCFH-DA可以自由穿过细胞膜，本身没有荧光。细胞内的酯酶可将DCFH-DA水解生成不能通过细胞膜的DCFH，这样使得探针在细胞内形成积聚。经过经细胞内ROS的氧化，DCFH可转变为有荧光的DCF，且荧光的强度与ROS的水平成正比。 一、实验流程 以下是流式细胞仪检测贴壁细胞ROS的实验步骤及注意事项。 实验步骤： 1、准备细胞：将目的细胞均匀铺至六孔板中，实验组和对照组分别做相应处理，并预设空白管（即不 ………………………………