HPLC色谱柱污染后的再生方法

文章预览

戳蓝字“ 色谱 ”关注我们哦！ 众所周知，色谱柱用久了容易柱效、峰型变差，那么色谱柱被污染了，需要怎样冲洗或者再生呢？ 清洗色谱柱时，一般每种溶剂使用20倍以上柱体积去冲洗色谱柱，首先需确保色谱柱内没有缓冲液，且清洗前色谱柱中的残留溶剂应与后一种清洗溶剂互溶。 下面是不同种类填料色谱柱的常规冲洗方法。 对于各类污染的对应冲洗方案： 反相中盐析：95%水乙腈小流速冲洗，直至柱压下降。 反相中非极性化合物的强吸附：柱内无盐情况下，乙醇冲洗后二氯甲烷冲洗，基本能洗掉非极性化合物。 反相中残留蛋白：①95%水乙腈过渡后，用0.1%TFA水梯度洗脱至0.1%TFA（乙腈/异丙醇1：2）；如果是耐碱的色谱柱，可以在①的基础上再用 95 % 水 乙腈过渡 后，用 5 M尿素或5M硫氰酸胍（pH7）清洗 。 反相中金属离子残留：0.05M EDTA。 反相中 ………………………………