重组工程菌发酵表达

文章预览

跟着 Snapgene构建重组质粒（表达载体）超详细攻略 一文，详细介绍了重组质粒的构建，在 大肠杆菌感受态细胞的制备和质粒转化 一文中，我们成功将重组质粒转入受体细胞，经涂布、培养后，终于，带有目的基因的重组菌问世，想了解该目的基因表达效果如何，下一步怎么做？保姆级攻略往下看。 一、准备阶段（大肠杆菌为例） 根据试验需求，准备合适的培养基，比如说 LB ，参照 “微生物菜谱-培养基”精选策略 相关内容。 准备移液枪枪头，接种环，玻璃棒等。 二、种子培养阶段 1 .菌种活化： 方法参照 微生物菌种保藏与活化技术指南：收藏必备手册 和 无菌技术“规范”操作指南 相关内容。 2 .种子液接种： 从保存的平板上挑取单克隆至种子培养液中（ 50mL/250mL ），将其放置于恒温（ 37 ℃ ）摇床中振荡（ 200rpm ）培养，过夜（ 约12h ）。 ………………………………