免疫共沉淀Co-IP实验步骤详解及结果解读

文章预览

引言 免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation, Co-IP）是研究蛋白质相互作用（pull-down）的常用方法。其基本原理是利用抗体与目标蛋白质特异性结合的特性，将目标蛋白质及其相互作用的蛋白质复合物一起沉淀下来，进而分析这些蛋白质之间的相互作用。本文将详细介绍实验步骤，并指导如何解读结果。 原理： 1. 抗原-抗体特异性结合 ：实验中使用的抗体能够特异性地识别并结合到目标蛋白质（抗原）上。 2. 蛋白质复合物形成 ：如果目标蛋白质与其他蛋白质形成复合物，那么当抗体结合到目标蛋白质上时，整个复合物会被一同沉淀。 3. 沉淀与洗涤 ：通过添加如Protein A或Protein G等固相载体，这些载体可以与抗体结合，从而将抗体及其结合的蛋白质复合物一起沉淀下来。之后，通过洗涤去除非特异性结合的蛋白质。 4. 分析相互作用蛋白 ：沉淀下来的蛋白质 ………………………………