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复苏的细胞背景脏和出现小黑点可能是由于多种原因造成的,包括细胞碎片、细胞器折光、凋亡小体、血清中的沉淀物、微生物污染(如细菌、真菌、支原体等)或黑胶虫污染。处理这些问题的方法包括: 1.使用无菌操作和培养基中添加抗生素(双抗)来预防微生物污染。 2.如果怀疑是微生物污染,可以通过肉眼观察培养基是否混浊和在显微镜下观察黑点是否游动来判断。 3.对于细胞碎片和凋亡小体,可以通过离心和更换新鲜培养基来清除。 4.如果是血清中的沉淀物,可以尝试不进行热灭活处理的血清,因为热灭活可能会增加沉淀物的形成。 5.对于黑胶虫污染,可以尝试更换批次较好的血清、使用无菌的PBS洗细胞、换用一次性塑料培养瓶,并保持实验环境的洁净度。 如何区分细胞培养过程中出现的黑点是细胞碎片还是微生物污染? 在细胞
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