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近日,美国 特拉华大学(University of Delaware)Hanyuan Gao, Mugdha Pol,Xinqiao Jia等,在Nature Protocols上发文,报道了在三维细胞培养过程中,可原位修饰的合成胞外基质实验方案。 水凝胶体系,利用生物正交四嗪tetrazine (Tz) 与慢亲二烯体(降冰片烯norbornene, Nb) 和快亲二烯体(反式-环辛烯trans-cyclooctene, TCO)连接的模块化构件。通过缓慢的、非化学计量四嗪Tz/Nb反应,产生负载细胞的凝胶构建体。 培养几天后,通过与凝胶-液体界面网络中剩余四嗪Tz基团的快速反应,用TCO标记的分子补充细胞培养基,可以改变基质性质。由于Tz/TCO反应比分子扩散快,因此可简单地通过改变扩散物质的特性和扩散时间/路径,以时空方式改变基质性质。 这一合成策略不会干扰天然的生化过程,也不需要外部触发因素或第二种独立的化学物质。仿生三维培养,可通过标准的分子和细胞
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