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实验解析|翻译后修饰对WB实验有什么影响,如何避免?

实验老司机  · 公众号  ·  · 2024-12-30 07:00
    

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图片来源:https://www.technologynetworks.com/proteomics/articles/an-introduction-to-post-translational-modifications-343603 翻译后修饰(Post-translational modifications, PTMs)由于通常是通过在蛋白分子上增加一个基团达成修饰,对分子本身有物理改变,很可能对WB实验结果有所影响。由于翻译后修饰形式多种多样,对条带影响的具体表现包括但不限于以下所举例子: 1.  分子量变化 :磷酸化、糖基化、泛素化、泛素化等众多翻译后修饰形式会改变目标蛋白的分子量,可能导致靶标蛋白实际检测分子量大小出现偏差,蛋白样品在凝胶上的迁移位置与未修饰蛋白相比发生偏移,出现更高或更低的分子量带。 2.  构象变化 :由于其空间结构发生一定改变,将可能影响抗体与表位的结合,从而减少信号或引起非特异性结合。 3.  电荷变化 :如乙酰化、磷酸化等修饰可以改变蛋白的整 ………………………………

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