WB问与答‖蛋白煮沸变性时爆管，咋办？

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大家好，我是酸菜鱼，这里是酸菜鱼的实验小灶。 今天跟大家分享一个大多数实验人都可能遇到过的一个WB样品制备问题： 暴沸！ 具体来说，就是指在将蛋白提取液与上样缓冲液一起100℃煮沸时，导致Ep管的盖子崩开了，造成样品的损失。 PS： 无论是水浴和金属浴都可能会遇到这种情况。 哈哈，小编也是其中之一！ 一般煮蛋白时爆管了的话样品也就几乎所剩无几了，特别是在样品比较多的时候，好不容易养了几天的细胞做好了干预提好的蛋白却止步在了变性这一步。说实话，真的很影响心情! 那该如何避免这种情况呢？是否可以把Ep管敞开口煮沸？ 带着问题，小编进行了尝试 开盖，100℃，煮沸10min 冷却，离心取上清后进行后续WB实验，实践证明这样确实就不会导致爆管了，条带也能正常出。 但又有了新的问题： 敞开来煮样本可能会蒸发从而导 ………………………………