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激光扫描共聚焦显微镜以激光束作光源,通过照明针孔,对标本焦平面上每一点进行扫描,逐点激发样品内荧光,该点以外的任何发射荧光均被探测针孔阻挡(照明针孔与探测针孔对被探测点是共轭的,所以被探测点即共焦点,被探测点所在的平面即共焦平面)有效抑制了非聚焦平面的杂散光,相比于普通的荧光显微镜,其分辨率和清晰度都显著提高。 本文以蔡司LSM980为例介绍激光共聚焦显微镜的使用方法。 1、开机 (1)打开main switch,水平状态为off,垂直状态为on; (2)打开Laser(转动钥匙),水平状态为off,垂直状态为on; (3)打开components; (4)若需要在物镜下面观察荧光分布,打开金属卤化灯(注意30分钟之内不要反复开关); (5)打开电脑注意,启动软件,选择ZEN system(若关机则按照反向顺序操作)。 2、参数设置及拍照 (
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